固相萃取-LC-MS/MS測(cè)定污水中毒品及其代謝物

            前言

毒品問題一直是社會(huì)高度關(guān)注的焦點(diǎn)，污水中毒品及其代謝物的檢測(cè)不僅能夠反映當(dāng)?shù)氐亩酒窞E用情況，更能反映某個(gè)特定區(qū)域禁毒工作效果，警方能通過污水毒品檢測(cè)客觀分析，構(gòu)建毒情形勢(shì)監(jiān)測(cè)體系，有利于把控毒品發(fā)展態(tài)勢(shì)，全面科學(xué)分析毒品濫用情況、確定毒情泛濫區(qū)域，進(jìn)而強(qiáng)有力地推進(jìn)禁毒工作。本文參考《污水中13種毒品及其代謝物的固相萃取方法研究》，使用萊伯泰科SPE1000全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)進(jìn)行污水中的毒品及其代謝物的萃取處理，經(jīng)M64高通量平行濃縮儀濃縮后用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)，從而測(cè)定污水中毒品及其代謝物的含量，該方法能夠快速、高效、穩(wěn)定地達(dá)到實(shí)驗(yàn)的要求。

1、儀器設(shè)備

1.1 SPE1000全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)（萊伯泰科）；

1.2 M64高通量平行濃縮儀（萊伯泰科）；

1.3 SCIEX Exion LC™液相系統(tǒng)+Triple Quad™4500質(zhì)譜系統(tǒng)（SCIEX）。

2、試劑與耗材

2.1 甲醇：色譜純；

2.2 乙腈：色譜純；

2.3 甲酸：色譜純；

2.4 濃氨水：色譜純；

2.5 濃鹽酸；

2.6 5%氨水甲醇溶液：量取氨水5mL，加甲醇稀釋至100mL，混勻；

2.7 10種毒品及其代謝物標(biāo)準(zhǔn)溶液：各1000μg/mL；

2.8 10種毒品及其代謝物內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液：各100μg/mL；

2.9 玻璃纖維濾膜：1.2μm；

2.10 200μL內(nèi)襯管；

2.11 微孔濾膜 0.22μm，PTFE ,LabTech；

2.12 固相萃取柱： MCX柱（60mg，3CC）（萊伯帕茲， PZ12702）。

3、實(shí)驗(yàn)過程

3.1 取樣

將污水檢材樣品解凍并充分搖勻，加入濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至小于2，使用溶劑過濾器和玻璃纖維濾膜過濾，取濾液待分析用。在固相萃取之前，取50mL已過濾樣品加入100μL內(nèi)標(biāo)混合溶液（25ng/mL）。

3.2 固相萃取凈化

按照?qǐng)D1所示的方法進(jìn)行樣品的固相萃取凈化步驟，收集洗脫液待濃縮。

圖1 固相萃取方法

3.3 濃縮

將固相萃取的收集瓶置于M64高通量平行濃縮儀中濃縮，按照水浴溫度50℃、氮?dú)鈮毫?psi的條件濃縮至近干，加入0.1%甲酸水溶液250μL復(fù)溶，混勻后用微孔濾膜過濾，裝于200μL內(nèi)襯管中，供儀器檢測(cè)。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

取與檢材樣品等量的自來水，添加混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，使其中目標(biāo)物的濃度為1ng/L、5ng/L、10ng/L、50ng/L、100ng/L、500ng/L,配制成標(biāo)準(zhǔn)曲線系列，與檢材樣品平行操作，經(jīng)3.2、3.3的方法進(jìn)行處理，供儀器檢測(cè)。

3.5 液相色譜條件

色譜柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；

流動(dòng)相：A: 0.1％甲酸水溶液；B:乙腈；

流速：0.3 mL/ min；柱溫：40℃；進(jìn)樣量：5μL；

洗脫梯度：0~6.0min，5%B；6~6.2min，25%B；6.2~8.0min， 100%B；8.0~8.2min，5%B；8.20~10.0min，5%B。

3.6 質(zhì)譜條件

離子源：ESI源，正離子模式；

離子源參數(shù)：

IS電壓：5500V； 氣簾氣CUR:35psi；

霧化氣GS1:55 psi ；輔助氣GS2:60psi；

源溫度TEM:600 ℃ ；碰撞氣CAD:6。

4、結(jié)果和討論

4.1 各種樣品譜圖

4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

由上圖可知，所有物質(zhì)均滿足相關(guān)系數(shù)R大于0.995，線性良好。

4.3 加標(biāo)回收率

加標(biāo)樣品經(jīng)固相萃取凈化、洗脫、濃縮后，上機(jī)分析，定量，計(jì)算得到的加標(biāo)回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差如表2所示。

5、結(jié)論

在本次實(shí)驗(yàn)中，由表2可知，10種毒品及其代謝物的加標(biāo)回收率為78.0%~127.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.6%-9.6%，均滿足要求。綜上所述，使用萊伯泰科SPE1000全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)和M64高通量平行濃縮儀對(duì)污水中的毒品及其代謝物進(jìn)行提取、濃縮，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程快速、高效。

本實(shí)驗(yàn)中，使用SPE1000可以精準(zhǔn)控制流速達(dá)到更好的萃取效果，并且在后續(xù)濃縮步驟中，無需轉(zhuǎn)移洗脫液，可直接使用M64濃縮，減少了目標(biāo)物損失，同時(shí)減少了實(shí)驗(yàn)的系統(tǒng)誤差。

6、參考文獻(xiàn)

謝劉洋,謝明仁.污水中13種毒品及其代謝物的固相萃取方法研究[J].廣東公安科技,2021（4）:31-34。